收藏本站
《浙江海洋大学》 2017年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

卵型芳香化酶基因在鮸鱼卵巢发育过程中的表达模式研究

杨潘  
【摘要】:细胞色素芳香化酶P450是催化雌二醇合成的关键酶,能使得雄激素向雌激素转化,该基因在雄性性腺的检测表达却相对较低。我们使用芳香化酶抑制剂能抑制芳香化酶的表达。在鱼类的实验研究中我们发现的两种基因编码的p450arom,它们分别是大量表白于性腺和脑。这两种芳香化酶都具有特异性的启动因子,表达受不同调节因子的调控。在胚胎发育过程中:我们检测到不同的时空表达,具有独特的功能。在芳香化酶反应过程中,P450芳香化酶起着主要的作用。所以我们认为,开展芳香化酶的研究具有重要意义。哺乳动物中,卵巢芳香化酶主要在卵泡的颗粒细胞中,催化激素与颗粒细胞的受体结合,使得颗粒细胞逐渐增长,并不断合成芳香化酶。研究发现颗粒细胞自身并不能合成雄性激素,这一反应是黄体生成素和内膜细胞结合,促得使细胞将乙酸和胆固醇转变为雄烯二酮,雄烯二酮再经扩散作用进入颗粒细胞,最后在颗粒细胞内被芳香化,从而形成雌性雌性激素被分泌到卵泡和血液中,进而达到促使卵泡发育的作用。在对鮸鱼的实验研究中,我们发现,芳香化酶在2-3月的鮸鱼体内能够检测到芳香化酶的时空表达,在其血液中也可以检测到雌二醇,这表明鮸鱼在性腺发育的早期已经初步具备类固醇合成聚合能力。并且我们发现芳香化酶的活性在鮸鱼体内的随着卵巢的发育而不断得到增强。它催化雄性激素向雌性激素转化。综上所述,我们认为鮸鱼卵型芳香化酶在卵巢发育过程中能够促进卵细胞中卵黄的生成和积累,使得卵子的发育能够正常进行,其对鮸鱼卵巢发育有重要作用。
【关键词】:芳香化酶 转录水平 卵巢发育
【学位授予单位】:浙江海洋大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S917.4
【目录】:
  • 摘要8-9
  • ABSTRACT9-13
  • 缩略用语及中英文对照表13-15
  • 第一章 文献综述15-25
  • 1.1 种群结构15
  • 1.2 鱼类卵巢的组织学分期15-16
  • 1.3 自然条件下的鱼类性别逆转16-17
  • 1.4 基因与鱼类性别17
  • 1.5 人为手段改变鱼类的性别17-18
  • 1.6 采取人为手段的意义18-19
  • 1.7 芳香化酶基因介绍19-21
  • 1.8 芳香化酶基因的特点21-22
  • 1.9 芳香化酶在鱼卵巢发育中的表达状况研究22-23
  • 1.10 芳香化酶在水产中的应用概述23
  • 1.11 研究目标和拟解决的关键问题23-25
  • 第二章 材料方法与实验设计25-36
  • 2.1 仪器和设备25-26
  • 2.2 试剂与试剂盒26
  • 2.3 主要试剂和酶26-28
  • 2.4 实验材料28
  • 2-4-1 载体、菌株和细胞28
  • 2-4-2 实验用鱼28
  • 2.5 实验方法28-36
  • 2-5-1 各种生物学组织总RNA的提取28-29
  • 2-5-2 提取基因组DNA (苯酚氯仿法)29-30
  • 2-5-3 质粒DNA的提取30-31
  • 2-5-4 序列分析31
  • 2-5-5 RT-PCR31-32
  • 2-5-6 感受态制作与质粒转化32-33
  • 2-5-7 目的基因在大肠杆菌中的表达33
  • 2-5-8 免疫荧光定位33-34
  • 2-5-9 提取RNA和合成SMART c DNA34
  • 2-5-10 克隆鮸鱼cyp19a1a基因34-35
  • 2-5-11 克隆鮸鱼cyp19a1a启动子35-36
  • 第三章 实验结果及分析36-41
  • 3.1 氨基酸序列比较和系统发育分析36-37
  • 3.2 多克隆抗血清制备和Westerm印迹分析37
  • 3.3 鮸鱼免疫组织化学定位和定量cyp19a1a在卵巢中的表达37-39
  • 3.4 鮸鱼体内cyp19a1a启动子在斑马鱼中的表达分析39-41
  • 第四章 讨论41-44
  • 4.1 芳香化酶基因具有保守性41-42
  • 4.2 鮸鱼芳香化酶基因表达具有组织细胞特异性42
  • 4.3 Mmcyp19a1a启动子的特异性42-43
  • 4.4 总结43-44
  • 参考文献44-47
  • 致谢47-48
  • 在读期间发表的学术论文及研究成果48

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李明云;郑忠明;管丹东;叶帅东;徐万土;;鮸鱼工厂化育苗技术[J];中国水产;2007年02期
2 陶诗;王健鑫;刘雪珠;何芳芳;俞凯成;;鮸鱼消化道细菌群落结构及多样性初步研究[J];南方水产科学;2013年04期
3 商金发;;鮸鱼张网的捕捞技术[J];海洋渔业;1991年02期
4 孙庆海,施维德,陈诗凯;鮸鱼工厂化育苗技术[J];渔业现代化;2004年02期
5 胡健饶;章丽梅;史雨红;陈炯;;一株鮸鱼溃疡致病菌的分离及鉴定[J];杭州师范大学学报(自然科学版);2011年05期
6 徐万土;龚佳男;谢海军;;鮸鱼血液生理生化指标分析[J];宁波大学学报(理工版);2014年03期
7 谢立峰;鮸鱼室内越冬及生长观察[J];水产养殖;2004年02期
8 王伟;叶霆;闫家强;竺俊全;;鮸鱼精子的生理特性及超低温冻存[J];生物学杂志;2010年06期
9 罗海忠;施兆鸿;柳敏海;彭志兰;陈波;傅荣兵;;春季繁殖鮸鱼亲鱼血清中雌二醇、孕酮和睾酮水平变化分析[J];海洋渔业;2008年02期
10 单乐州;林志华;邵鑫斌;;鮸鱼人工繁育技术研究[J];水产科技情报;2006年01期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 黄云波;;温州鮸鱼菜肴[A];中国改革创新先锋暨经济建设杰出人物风采[C];2012年
2 潘晓东;吴天星;宋增幅;蔡立胜;;丁酸梭菌对鮸鱼肠粘膜结构及肠内短链脂肪酸的影响[A];第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集(上册)[C];2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 舒畅;鮸鱼IRF1亚家族成员基因结构及进化分析[D];浙江海洋大学;2016年
2 李金蕊;鮸鱼NLR家族的基因组水平研究和表达模式分析[D];浙江海洋大学;2016年
3 许国良;鮸鱼鳗弧菌感染相关microRNA的鉴定及分析[D];浙江海洋大学;2016年
4 刘江;鮸鱼MHC ⅡA和ⅡB基因多态性及分子进化分析[D];浙江海洋大学;2016年
5 王彦金;鮸鱼TLR1分子特征、功能及调控研究[D];浙江海洋大学;2016年
6 杨潘;卵型芳香化酶基因在鮸鱼卵巢发育过程中的表达模式研究[D];浙江海洋大学;2017年
7 孟繁蔷;鮸鱼(Miichthys miiuy)自然杀伤细胞增强因子基因克隆及表达分析[D];浙江海洋学院;2014年
8 孙悦燕;鮸鱼转铁蛋白基因的克隆及进化分析[D];浙江海洋学院;2014年
9 车荣波;基于转录组数据的鮸鱼分子标记筛选及基因差异表达分析[D];浙江海洋学院;2015年
10 王善辰;鮸鱼补体基因家族成员分子结构及表达分析[D];浙江海洋学院;2015年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026