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《青海大学》 2017年
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水母雪莲表皮毛发育相关基因SmTTG1的遗传转化研究

胡学敏  
【摘要】:水母雪莲(Saussurea medusa Maxim),又称水母雪兔子,属菊科风毛菊属,是一种生长于青藏高原地区的珍稀、濒危药用植物。同时,它又是一种典型的高山植物。植株密被表皮毛是水母雪莲最具有代表性的形态特征,它是水母雪莲对极端环境的一种适应结构。研究水母雪莲表皮毛的形成和发育过程,对揭示高山植物适应环境的特殊机制将具有重要的理论意义。为此,本研究以水母雪莲作为实验材料,以表皮毛发育相关基因SmTTG1为研究对象,构建了SmTTG1基因的植物表达载体,通过根癌农杆菌为介导,转入普通烟草中。主要研究结果如下:(1)根据本实验室已克隆得到的水母雪莲SmTTG1基因序列(Genbank登陆号:KX447632),在其CDS两侧分别设计上下游引物,在上游引物5′端加入酶切位点SalⅠ,在下游引物5′端加入酶切位点Bam HⅠ,克隆了水母雪莲SmTTG1基因的CDS序列(含酶切位点)。(2)通过酶切法,将目的基因SmTTG1插入质粒pRI 101-AN DNA的多克隆位点,构建了植物表达载体pRI 101-AN-SmTTG1,并通过冻融法将其导入农杆菌C58C1中。(3)在根癌农杆菌介导下,通过叶盘法将目的基因SmTTG1转入普通烟草中。通过PCR和RT-PCR检测,获得8株转基因烟草植株。形态学比较表明,转基因烟草植株与对照植株无明显差异,说明SmTTG1基因过量表达不一定对烟草的形态产生影响。
【学位授予单位】:青海大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S567.239;Q943.2

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