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《中国科学院大学(中国科学院海洋研究所)》 2017年
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水通道蛋白7、8及精液pH值对大菱鲆(Scophthalmus maximus)精子活力影响研究

安皓  
【摘要】:鱼类精子活力的影响因素复杂多样,其中水通道蛋白和p H是重要的影响因素。水通道蛋白是一种位于生物细胞膜上的内在膜蛋白,可以控制水分子及其他小分子物质进出细胞,对生物体的正常生理活动至关重要。目前在哺乳类中共发现13种水通道蛋白,其中有8种在鱼类生殖系统中被发现。有研究表明,AQP7在心肌细胞中能转运甘油提供能量;AQP7对精子转运水的能力并无影响,可能通过运输甘油来提供能量基质来影响精子活力;AQP8在调节精子体积和线粒体内活性氧簇运输方面十分重要。关于p H对鱼类精子活力的影响,以往研究多集中在外界不同p H对精子活力的影响,对精液自身p H与精子活力关系研究的较少。在我国大菱鲆(Scophthalmus maximus)是重要的海水经济鱼类,本论文以大菱鲆为研究对象,阐明AQP7、AQP8在大菱鲆精子发育及成熟过程中的表达特征及对精子活力的影响机制,同时通过对大菱鲆精子活力的检测和评价,探究精液活力与p H的关系。主要结果如下:1)获得AQP7基因全长共1315bp,获得了AQP8部分片段共584bp;AQP7、AQP8mRNA在精巢表达情况从2期到5期先升高后降低,其最高峰分别为3期和4期,但二者6期又有所升高;AQP7、AQP8原位杂交情况与mRNA表达水平相一致,二者在精巢表达情况从2期到5期先升高后降低,其最高峰分别为3期和4期,6期表达量又有所升高。AQP7蛋白从精原细胞到精子都有表达,且活力好的精子AQP7蛋白表达量较高,这暗示了AQP7对精子活力有促进作用。2)精子活化率高、寿命长的大菱鲆精液p H偏弱碱性(p H=8.0左右),即大菱鲆精子适宜在弱碱性环境中活动;大菱鲆精子运动特性受p H影响显著,精液p H与平均路径速度(VAP)、平均直线运动速度(VSL)、平均曲线运动速度(VCL)、精子平均鞭打频率(BCF)、精子头侧摆幅度(ALH)、呈显著正相关(p0.05),而与运动前向性(STR)、运动直线性(LIN)、运动摆动性(WOB)等参数无显著相关性;大菱鲆精子运动特性与精子活化率相关性显著,其中精子活化率与平均路径速度(VAP)平均直线运动速度(VSL)、平均曲线运动速度(VCL)、精子平均鞭打频率(BCF)、精子头侧摆幅度(ALH)、呈显著正相关(p0.05),与运动前向性(STR)、运动直线性(LIN)、运动摆动性(WOB)等参数无显著相关性。3)向激活海水中加入梯度甘油,发现可以显著提高大菱鲆精子寿命,其中甘油浓度为100 mmol/L时,精子寿命延长至15.17±0.29 min,推测甘油在精子激活后可能被精子吸收并氧化分解提供能量。
【学位授予单位】:中国科学院大学(中国科学院海洋研究所)
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S917.4

【参考文献】
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